MF1740_3: Análisis de biología molecular en muestras biológicas

Análisis de biología molecular en muestras biológicas

Código de Análisis de biología molecular en muestras biológicas

• MF1740_3

Duración de  Análisis de biología molecular en muestras biológicas

• 150 horas

Competencias de MF1740_3: Análisis de biología molecular en muestras biológicas

C1: Aplicar técnicas de extracción, cuantificación y purificación del ADN y/o ARN en muestras biológicas, mediante sistemas manuales o automáticos, cumpliendo normas de seguridad.

• CE1.1 Describir el ADN y ARN, estableciendo sus diferencias en cuanto a estructura, función y localización.

• CE1.2 Citar equipos, material auxiliar y reactivos para la extracción, cuantificación y purificación del ADN y/o ARN, indicando su manejo y precauciones a adoptar.

• CE1.3 Explicar la calibración, control de los sistemas de medida e incertidumbre de medida, indicando su finalidad.

• CE1.4 Definir la ley de Lambert?Beer, indicando sus aplicaciones en la espectrofotometría de absorción ultravioleta?visible y en la cuantificación de ADN.

• CE1.5 Describir técnicas de extracción de ADN y ARN de muestras biológicas, indicando métodos para su cuantificación y purificación.

• CE1.6 Enumerar causas de degradación del ARN en el proceso de su extracción, indicando las precauciones para evitarla.

• CE1.7 En un supuesto práctico de análisis de ADN y/o ARN, preparando muestras y reactivos:

  • Realizar diluciones, reconstituciones y disoluciones marcadas en protocolos, evitando contaminaciones.
  • Realizar procedimientos previos a la extracción de ADN y/o ARN, como homogenización, centrifugación u otros.
  • Extraer ARN y ADN, realizando su comprobación, cuantificación, purificación y almacenamiento.
  • Eliminar los residuos generados durante el procedimiento de extracción de ADN y/o ARN, a través de la entidad responsable, cumpliendo la normativa aplicable de gestión de residuos.

C2: Aplicar técnicas de extracción, cuantificación y purificación de proteínas en muestras biológicas, mediante sistemas manuales o automáticos, cumpliendo normas de seguridad.

• CE2.1 Definir la estructura y tipos de proteínas, indicando sus funciones.

• CE2.2 Explicar la traducción a proteínas, en relación con la replicación y transcripción.

• CE2.3 Explicar las modificaciones postraduccionales de las proteínas, indicando sus consecuencias funcionales.

• CE2.4 Citar equipos, material auxiliar y reactivos para la extracción, cuantificación y purificación de proteínas indicando su manejo y las precauciones a adoptar.

• CE2.5 Explicar los métodos Bradford, Lowry y otros empleados en la cuantificación de proteínas indicando materiales y aplicación de las técnicas.

• CE2.6 En un supuesto práctico de análisis de proteínas, preparando muestras y reactivos:

  • Realizar los procedimientos previos a la extracción de proteínas, efectuando diluciones, reconstituciones, disoluciones, homogenización, centrifugación u otros.
  • Realizar la extracción por método manual o automático, cuantificación, purificación y almacenamiento de proteínas.
  • Contrastar los valores obtenidos, comparándolos con los esperados.
  • Eliminar los residuos generados durante el procedimiento de extracción de proteínas, a través de la entidad responsable, cumpliendo la normativa aplicable de gestión de residuos.

C3: Analizar técnicas de PCR y de RT?PCR, amplificando regiones específicas de ADN, indicando sus aplicaciones.

• CE3.1 Describir la síntesis de ácidos nucleicos enumerando las enzimas implicadas y su función.

• CE3.2 Explicar la aplicación de PCR y RT?PCR, detallando materiales y métodos.

• CE3.3 Describir fuentes de contaminación de las técnicas de PCR y RT?PCR indicando pautas para evitarla.

• CE3.4 Explicar la transcripción del ADN enumerando las enzimas implicadas y su función.

• CE3.5 Definir las diferencias entre PCR y RT?PCR, indicando sus aplicaciones.

• CE3.6 Describir la estructura del cADN, indicando sus aplicaciones.

• CE3.7 En un supuesto práctico de amplificación de ADN, aplicando técnicas de PCR y de RT?PCR:

  • Preparar el análisis, comprobando las condiciones ambientales y la disponibilidad de los reactivos.
  • Programar el termociclador, en función de la aplicación de las técnicas y sus variantes.
  • Comprobar que el material genético obtenido es suficiente, almacenándolo para su procesamiento posterior.
  • Eliminar los residuos generados durante el procedimiento de amplificación de regiones específicas de ADN, a través de la entidad responsable, cumpliendo la normativa aplicable de gestión de residuos.

C4: Aplicar técnicas de separación y purificación de fragmentos de ADN y de proteínas, mediante electroforesis.

• CE4.1 Indicar técnicas electroforéticas, especificando las aplicadas en análisis de ADN y proteínas.

• CE4.2 Explicar la electroforesis, explicando los factores que influyen en la técnica como campo eléctrico, muestras, tampón y soporte, entre otros.

• CE4.3 Describir el equipo de electroforesis, diferenciando electroforesis unidimensional y bidimensional.

• CE4.4 Describir los tipos de marcadores, tipos de tinción y detección en función de la muestra a analizar.

• CE4.5 Explicar la electroforesis aplicada a proteínas, describiendo la transferencia a membrana.

• CE4.6 Describir de la reacción antígeno?anticuerpo y su utilidad en la determinación de proteínas explicando los tipos de marcaje de anticuerpos y detección de los mismos.

• CE4.7 Explicar técnicas de inmunodetección, describiendo la realización de inmunoelectroforesis, inmunofijación o isoelectroenfoque.

• CE4.8 En un supuesto práctico de separación y purificación de fragmentos de ADN y de proteínas, mediante técnicas electroforéticas:

  • Seleccionar el tipo de electroforesis, indicando el tiempo y el voltaje de la fuente de alimentación según la muestra a procesar.
  • Hacer las diluciones, estableciendo controles de referencia.
  • Seleccionar el marcador de peso molecular requerido y el tipo de marcaje y/o tinción específicos, según la muestra a procesar.
  • Aplicar las técnicas de electroforesis en geles de poliacrilamida y de electroforesis en geles de agarosa, comprobando la separación de las distintas fracciones electroforéticas.
  • Visualizar los fragmentos de ADN, cuantificándolos.
  • Aplicar las técnicas de inmunoelectroforesis, inmunofijación e isoelectroenfoque, comprobando la separación de proteínas.
  • Eliminar los residuos generados en el procedimiento de separación de fragmentos de ADN y/o proteínas, a través de la entidad responsable, cumpliendo la normativa aplicable de gestión de residuos

C5: Aplicar técnicas de hibridación mediante sondas genéticas y análisis de fragmentos de ADN, en relación con la identificación de genes.

• CE5.1 Especificar aplicaciones de la técnica de hibridación con sondas genéticas, detallando los tipos de sondas, sensibilidad, especificidad y precauciones para su manipulación.

• CE5.2 Definir complementariedad de bases e hibridación, indicando las condiciones de temperatura, pH y concentración que influyen en el proceso.

• CE5.3 Describir métodos de detección de la hibridación en función de la sonda genética utilizada.

• CE5.4 Explicar técnicas de hibridación tales como Southern, Northern, microarrays, entre otras.

• CE5.5 Describir la obtención, análisis e identificación de fragmentos de ADN mediante enzimas de restricción, indicando tipos y funciones y enumerando los diferentes marcajes y/o tinciones.

• CE5.6 Explicar las técnicas utilizadas para la detección de mutaciones y polimorfismos, indicando las limitaciones de las mismas y los procesos clave para su correcta realización.

• CE5.7 En un supuesto práctico de hibridación con sonda, en relación con la identificación de genes:

  • Verificar los equipos y reactivos disponibles, comprobando su funcionamiento y condiciones.
  • Aplicar técnicas de hibridación, considerando Southern, Northern, microarrays, entre otras.
  • Detectar la señal de la sonda, identificando genes.
  • Eliminar los residuos generados en el procedimiento de hibridación, a través de la entidad responsable, cumpliendo la normativa aplicable de gestión de residuos.

• CE5.8 En un supuesto práctico de análisis de fragmentos de ADN, en relación con la identificación de genes:

  • Verificar los equipos y reactivos disponibles, comprobando su funcionamiento y condiciones.
  • Seleccionar los enzimas de restricción específicas, el tipo de marcaje o tinción indicando la técnica de electroforesis o hibridación.
  • Aplicar técnicas de análisis de fragmentos, contrastando los resultados y verificando la técnica.
  • Eliminar los residuos generados en el análisis de fragmentos de ADN, a través de la entidad responsable, cumpliendo la normativa aplicable de gestión de residuos.

C6: Aplicar la técnica de secuenciación de fragmentos de ADN, amplificando y purificando sus productos.

• CE6.1 Definir la secuenciación de fragmentos de ADN explicando su fundamento.

• CE6.2 Describir el funcionamiento del secuenciador indicando los conceptos de control y control interno, configuración y calibración del secuenciador.

• CE6.3 Describir los reactivos, procedimientos de preparación y cantidad necesaria a emplear en la secuenciación de fragmentos de ADN.

• CE6.4 Explicar métodos de preparación de la muestra previos a la secuenciación.

• CE6.5 Interpretar los resultados especificando las posibles interferencias de la técnica de secuenciación.

• CE6.6 Indicar aplicaciones de la técnica de secuenciación de ADN ordenándolas según el grado de utilización.

• CE6.7 En un supuesto práctico de secuenciación de fragmentos de ADN, amplificando y purificando sus productos:

  • Comprobar el tamaño de los productos amplificados para su secuenciación.
  • Amplificar la secuencia de ADN requerida empleando cebadores específicos utilizando didesoxinucleótidos trifosfato marcados con distintos fluorocromos para identificación.
  • Purificar los productos amplificados, preparándolos para su secuenciación.
  • Preparar los reactivos y el secuenciador, configurándolo, calibrándolo y programándolo.
  • Aplicar la técnica de secuenciación de fragmentos de ADN, contrastando los resultados y verificando la técnica.
  • Eliminar los residuos generados en el procedimiento de secuenciación de fragmentos de ADN, a través de la entidad responsable, cumpliendo la normativa aplicable de gestión de residuos.

C7: Analizar técnicas de separación e identificación de proteínas mediante técnicas de cromatografía, inmunodetección y proteómica.

• CE7.1 Explicar técnicas cromatográficas (cromatografía en papel, cromatografía en capa fina, cromatografía de gases, cromatografía de intercambio iónico, cromatografía de exclusión, cromatografía de afinidad, cromatografía líquida de alta resolución), indicando sus aplicaciones.

• CE7.2 Describir técnicas de inmunodetección, estructura, tipos y función de los antígenos y anticuerpos, así como las precauciones para la interpretación de resultados.

• CE7.3 Explicar técnicas de proteómica, indicando fundamento y aplicaciones, describiendo la espectrometría de masas y los equipos empleados, así como la utilidad de las bases de datos para la identificación de proteínas.

• CE7.4 Indicar tipos y funciones de las proteasas, describiendo métodos de ionización.

• CE7.5 Explicar los parámetros utilizados en relación con la interpretación de los resultados de técnicas proteómicas.

• CE7.6 En un supuesto práctico de separación e identificación de proteínas mediante cromatografía:

  • Seleccionar la técnica cromatográfica, considerando la muestra biológica a separar.
  • Verificar los equipos y reactivos para cromatografía, comprobando su funcionamiento y condiciones.
  • Aplicar la técnica cromatográfica seleccionada, considerando cromatografía en papel, cromatografía en capa fina, cromatografía de gases, cromatografía de intercambio iónico, cromatografía de exclusión, cromatografía de afinidad o cromatografía líquida de alta resolución.
  • Eliminar los residuos generados en el procedimiento de separación e identificación de proteínas, a través de la entidad responsable, cumpliendo la normativa aplicable de gestión de residuos.

• CE7.7 En un supuesto práctico de identificación de proteínas mediante inmunodetección:

  • Seleccionar la técnica de inmunodetección entre las disponibles en función del tipo de muestra y finalidad.
  • Verificar los equipos y reactivos para inmunodetección, comprobando su funcionamiento y condiciones.
  • Aplicar la técnica de inmunodetección seleccionada, considerando enzimoinmunoanálisis, quimioinmunoluminiscencia, inmunofluorescencia, radioinmunoanálisis, inmunohistoquímica, inmunofijación, microarrays o inmunoelectroforesis.
  • Eliminar los residuos generados en el procedimiento de identificación de proteínas, a través de la entidad responsable, cumpliendo la normativa aplicable de gestión de residuos.

• CE7.8 En un supuesto práctico de análisis de proteínas, aplicando técnicas de proteómica:

  • Separar las proteínas mediante la técnica electroforética indicada, en función de la muestra.
  • Verificar los equipos y reactivos, comprobando su funcionamiento y condiciones.
  • Aplicar técnicas de proteómica, en relación con su identificación.
  • Eliminar los residuos generados en el análisis de proteínas, a través de la entidad responsable, cumpliendo la normativa aplicable de gestión de residuos.

Contenidos de MF1740_3: Análisis de biología molecular en muestras biológicas

1 Muestras biológicas para análisis de ADN, ARN y proteínas: obtención, manipulación, procesamiento, conservación y transporte

• Tipos de muestras para análisis de ADN, ARN y proteínas.
• Determinación analítica.
• Perfil analítico.
• Cartera de servicios.
• Errores más comunes en la manipulación de las muestras.
• Características generales de la obtención y procesamiento de muestras para análisis de ADN, ARN y proteínas.
• Conservación y transporte de las muestras según la normativa vigente.
• Eliminación de los residuos generados en los análisis de ADN, ARN y proteínas.
• Prevención de riesgos en la obtención, manipulación, procesamiento, conservación y transporte de muestras biológicas.

2 Biología molecular: ADN, ARN y proteínas

• Composición molecular, estructura y función de los ácidos nucleicos.
• Enzimas asociados a los ácidos nucleicos.
• Replicación del ADN.
• Transcripción del ADN y su control.
• Modificaciones postranscripcionales.
• Mecanismos de reparación del ADN.
• Mutaciones del ADN, alteraciones en las proteínas que sintetizan y enfermedades asociadas.
• Estructura y función de las proteínas.
• Transcripción y traducción.
• Síntesis y modificación de las proteínas.
• Alteraciones conformacionales de las proteínas.

3 Metodología aplicada al análisis de ácidos nucleicos

• Extracción.
• Purificación y análisis espectroscópico y electroforético de ácidos nucleicos.
• Amplificación de ADN mediante PCR y variantes.
• Electroforesis y técnicas relacionadas.
• Hibridación de ácidos nucleicos.
• Análisis de fragmentos de ADN.
• Secuenciación.
• Tecnología de microarrays y chips de ácidos nucleicos.
• Bioinformática.
• Bases de datos de genómica.

4 Metodología aplicada al análisis de proteínas

• Electroforesis unidimensionales, bidimensionales y técnicas relacionadas.
• Técnicas cromatográficas.
• Técnicas de inmunodetección.
• Espectrometría de masas.
• Tecnología de microarrays y chips de proteínas.
• Bioinformática.
• Bases de datos de proteómica.

5 Enfermedades de base genética

• Genoma: células, cromosomas y genes.
• Estructura y función de los genes y cromosomas.
• Bases cromosómicas de la enfermedad.
• Herencia y enfermedad: enfermedades monogénicas, patrones de herencia, enfermedades poligénicas.
• Susceptibilidad genética.
• Genética de las enfermedades comunes.
• Genética de la reproducción y del diagnóstico prenatal.
• Diagnóstico en medicina legal y forense.
• Modelos animales de enfermedad de base genética.

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