MF0381_3: Técnicas de inmunohistoquímica y biología molecular

Técnicas de inmunohistoquímica y biología molecular.

MF0381_3.

Módulo de formación MF0381_3: Técnicas de inmunohistoquímica y biología molecular.

Aplicar técnicas de inmunohistoquímica, inmunofluorescencia y biología molecular, bajo la supervisión del facultativo

120 horas.

C1: Programar la preparación de las muestras y de los reactivos requeridos para realizar técnicas de inmuno-histoquímica o de inmuno-fluorescencia para que se encuentren disponibles en el momento de realizar las técnicas y no demorar su procedimiento, cumpliendo la normativa aplicable.

• CE1.1 Describir el material requerido para realizar las técnicas de inmuno-histoquímica o inmuno-fluorescencia.
• CE1.2 Definir las propiedades de los reactivos usados en inmunohistoquímica y su modo de acción.
• CE1.3 Citar los principales métodos de fijación de muestras destinadas a inmuno-florescencia.
• CE1.4 Describir las partes y el funcionamiento de un microscopio de fluorescencia.
• CE1.5 En un supuesto práctico de preparación de una técnica inmunohistoquímica determinada:
  • – Describir las partes del protocolo a seguir.
  • – Preparar las soluciones de anticuerpos a la dilución requerida.
  • – Realizar el pretratamiento de las muestras, siguiendo protocolos.
  • – Seleccionar los controles positivos y negativos requeridos.

C2: Analizar las técnicas de inmunohistoquímica e inmunofluorescencia que requieren las diversas muestras biológicas en función de su orientación diagnóstica por las técnicas de tinción ordinarias.

• CE2.1 Diferenciar la aplicación de los marcadores de inmunotinción en función de los tejidos o celularidad que se quieren evaluar.
• CE2.2 Explicar la aplicación de los marcadores de inmunofluorescencia en función de los depósitos que se quieren evaluar.
• CE2.3 Explicar la necesidad de usar controles positivos y negativos.
• CE2.4 En un supuesto práctico de realización de una técnica inmunohistoquímica determinada:
  • – Preparar los reactivos requeridos.
  • – Realizar el pretratamiento de las muestras, siguiendo protocolos.
  • – Seleccionar los controles positivos y negativos requeridos.
  • – Describir los resultados obtenidos de la técnica, valorando la idoneidad de los mismos para su estudio por el patólogo.

C3: Analizar la aplicación de las técnicas de hibridación «in situ» (ISH) para determinar en qué situaciones se aplican, cumpliendo la normativa aplicable.

• CE3.1 Explicar el concepto de complementariedad de la sonda de ADN.
• CE3.2 Describir los diferentes tipos de reactivos utilizados en estas técnicas.
• CE3.3 Explicar el porqué de los diferentes pasos de la técnica de hibridación (fijación, pretratamiento, entre otros).
• CE3.4 Detallar las diferentes variantes de la técnica de ISH en función del marcador de ADN utilizado.
• CE3.5 En un supuesto práctico de realización de una técnica de hibridación in situ determinada:
  • – Seleccionar las sondas requeridas.
  • – Realizar el pretratamiento de las muestras, siguiendo protocolos.
  • – Detectar la presencia o no de la sonda en la muestra, valorando la idoneidad de la misma para su estudio por el patólogo.

C4: Analizar técnicas de amplificación del ADN reacción en cadena de polimerasa (PCR y variantes), para la preparación de muestras solicitadas por el patólogo, siguiendo protocolos y cumpliendo la normativa aplicable.

• CE4.1 Explicar el desarrollo de la electroforesis en geles, hibridación en filtro y polimorfismo.
• CE4.2 Describir los procesos de amplificación de los ácidos nucleicos previos a su visualización por estas técnicas.
• CE4.3 Citar las principales aplicaciones de la técnica de PCR y sus variantes.
• CE4.4 Precisar los ciclos de desnaturalización, anillamiento de cebadores y síntesis de ácidos nucleicos de la PCR (reacción en cadena de polimerasa).
• CE4.5 En un supuesto práctico de realización de una técnica de amplificación de ADN en una muestra determinada:
  • – Preparar las muestras para la extracción del ADN.
  • – Realizar la técnica de PCR convencional.
  • – Detectar la presencia del producto amplificado, explicando los resultados.

C5: Aplicar técnicas de secuenciación de ácidos nucleicos para los estudios de ADN (compatibilidad, secuenciación de genes, entre otros), siguiendo protocolos y cumpliendo la normativa aplicable.

• CE5.1 Explicar las propiedades químicas de los ácidos nucleicos.
• CE5.2 Describir la estructura y la función del ADN y de los distintos tipos de ARN.
• CE5.3 Describir las técnicas de secuenciación de ADN (métodos químicos y enzimáticos).
• CE5.4 Explicar el concepto de micromatrices y sus aplicaciones.
• CE5.5 En un supuesto práctico de interpretación de un electro-ferograma de una secuencia de ADN:
  • – Identificar las partes del gráfico obtenido.

C6: Aplicar las técnicas básicas de citogenética convencional y molecular en para el estudio de cariotipos.

• CE6.1 Describir el cariotipo humano.
• CE6.2 Citar las principales técnicas de análisis genético (citogenética convencional.
• CE6.3 Explicar los métodos de extracción de ADN de distintos tipos de material biológico.
• CE6.4 En un supuesto práctico de cariotipado convencional a partir de unas condiciones dadas:
  • – Describir las partes de los cromosomas.
  • – Analizar la posible existencia de anomalías cromosómicas y su tipo (numéricas y estructurales).

C7: Aplicar las técnicas de citometría de flujo para el análisis y la cuantificación celular según protocolos.

• CE7.1 Describir los componentes básicos y el funcionamiento de un citómetro.
• CE7.2 Detallar los protocolos técnicos de limpieza y mantenimiento de un citómetro.
• CE7.3 En un supuesto práctico de utilización de un citómetro con unas características técnicas establecidas:
  • – Programar un plan de mantenimiento del mismo.

Capacidades cuya adquisición debe ser completada en un entorno real de trabajo:

C1 respecto a CE1.5; C2 respecto a CE2.4; C3 respecto a CE3.5; C4 respecto a CE4.5; C5 respecto a CE5.5; C6 respecto a CE6.4; C7 respecto a CE7.3.

Otras capacidades:

• Mantener el área de trabajo con el grado apropiado de orden y limpieza.
• Demostrar creatividad en el desarrollo del trabajo que realiza.
• Demostrar cierto grado de autonomía en la resolución de contingencias relacionadas con su actividad.
• Proponer alternativas con el objetivo de mejorar resultados.
• Emplear tiempo y esfuerzo en ampliar conocimientos e información complementaria para utilizarlos en su trabajo.
• Aprender nuevos conceptos o procedimientos y aprovechar eficazmente la formación utilizando los conocimientos adquiridos.

1. Aplicación de técnicas inmunohistoquímicas

• Antígenos y anticuerpos: interacción antígeno-anticuerpo.
• Métodos inmuno-histoquímicos.
• Anticuerpos monoclonales y policlonales: marcaje de anticuerpos.
• Clasificación de las técnicas en función del marcador utilizado: fluorocromos, enzimas e iones metálicos.
• Procesamiento histológico y restablecimiento de la inmuno-reactividad tisular: técnicas de recuperación antigénica.
• Procedimientos de las técnicas inmunohistoquímicas y controles.
• Marcadores tumorales.

2. Aplicación de técnicas de extracción de ácidos nucleicos

• Estructura y función de los ácidos nucleicos.
• Propiedades físicas relacionadas con las técnicas de biología molecular.
• Endonucleasas de restricción y otras enzimas asociadas a los ácidos nucleicos.
• Mutaciones y polimorfismos.
• Técnicas de extracción de ADN en sangre periférica, biopsias y tejidos.
• Extracción de ARN.

3. Aplicación de técnicas de reacción en cadena de la polimerasa (PCR) y electroforesis al estudio de los ácidos nucleicos

• Técnicas de la reacción en cadena de la polimerasa (PCR) y variantes.
• Técnicas de electroforesis en gel.
• Técnicas de visualización de fragmentos e interpretación de resultados.
• Análisis de los productos de PCR.
• Aplicaciones diagnósticas y forenses de las técnicas de PCR.

4. Aplicación de técnicas de hibridación con sonda

• Tipos de sonda y tipos de marcaje.
• Procedimiento de hibridación.
• Técnicas de transferencia e hibridación de ácidos nucleicos en soporte sólido.
• Técnicas de hibridación en cromosomas y tejidos.

5. Determinación de métodos de clonación y secuenciación del ADN

• Clonación: componentes y fases del procedimiento de clonación.
• Bioinformática: análisis de bases de datos de ADN y proteínas.
• Métodos de secuenciación de ADN.
• Aplicación de las técnicas de biología molecular en el diagnóstico clínico.
• Aplicaciones de las técnicas de biología molecular en medicina legal y forense.
• Aplicación de las técnicas de biología molecular a biobancos y bancos de tumores.

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