MF1734_3: Análisis de toxicidad y ecotoxicidad en muestras forenses

Análisis de toxicidad y ecotoxicidad en muestras forenses.

MF1734_3.

Módulo de formación MF1734_3: Análisis de toxicidad y ecotoxicidad en muestras forenses.

Realizar análisis de toxicidad y ecotoxicidad en muestras forenses.

90 horas.

C1: Especificar técnicas de preparación de materiales, muestras, instrumentos y equipos según PNTs, en función del estudio de toxicidad y ecotoxicidad en muestras forenses.

• CE1.1 Indicar tipos de muestras judiciales para estudio de valoración del daño tóxico (sangre, humor vítreo, fluidos biológicos, tejidos) y de potencia ecotóxica (aguas, vertidos, suelos), concretando las características que deben anotarse para su descripción.
• CE1.2 Describir el equipamiento, materiales y controles de calidad (calibración, verificación, control de los equipos y medida de la incertidumbre), indicando su manejo y precauciones en su uso.
• CE1.3 Describir la preparación de reactivos, medios de cultivo, patrones y controles conforme a protocolos.
• CE1.4 Especificar la forma de conservación de muestras biológicas y no biológicas, líquidas y sólidas, según su naturaleza y tipo de análisis a realizar.
• CE1.5 Describir el registro, codificación, y conservación de muestras, submuestras, alícuotas y fracciones de forma unívoca según protocolos.
• CE1.6 En un supuesto práctico de preparación de materiales, muestras, instrumentos y equipos en un estudio de toxicidad medioambiental en muestras forenses, siguiendo PNTs:
  • – Identificar las muestras utilizando el tipo de codificación preestablecido y conservarlas en las condiciones indicadas en los protocolos.
  • – Describir y registrar las muestras anotando su naturaleza, características y condiciones.
  • – Preparar el material, muestras, reactivos, instrumentos y equipos necesarios para su procesado previo, según su naturaleza.

C2: Aplicar técnicas de análisis bioquímico o de biología molecular en muestras humanas o animales procedentes de individuos intoxicados o de cadáveres, según PNTs de evaluación de la exposición, afectación tóxica o causa de la muerte.

• CE2.1 Indicar la organización del trabajo diario mediante la confección de listados de trabajo para cada una de las técnicas a realizar atendiendo a limitaciones logísticas y de optimización.
• CE2.2 Describir las operaciones de centrifugación, homogeneización y/o extracción de las muestras y de preparación de reactivos, patrones y controles de calidad dependiendo de la finalidad diagnóstica.
• CE2.3 Especificar los instrumentos y equipos requeridos en cada tipo de análisis bioquímico o de biología molecular indicando su fundamento y aplicaciones.
• CE2.4 Describir las baterías de ensayos bioquímicos dependiendo de la finalidad diagnóstica (intoxicación por plaguicidas órganofosforados o carbámicos, consumo crónico de alcohol etílico, hipo o hiperglucemia, muerte súbita de origen cardíaco, u otras).
• CE2.5 Indicar cómo se realiza la valoración técnica de los resultados obtenidos en las muestras control o patrones de referencia destacando su importancia en la calidad de los resultados.
• CE2.6 Describir la forma de garantizar la trazabilidad y calidad de los resultados mediante el registro de incidencias y de resultados técnicos de la extracción y cuantificación de ADN en las HRDs.
• CE2.7 En un supuesto práctico de detección de daño tóxico frente a plaguicidas organofosforados en aves presuntamente expuestas siguiendo un protocolo:
  • – Realizar la calibración de los equipos según protocolos.
  • – Preparar la muestra de sangre de las aves enfermas y de las aves controles sanas conforme a protocolos.
  • – Preparar el equipo y los reactivos de acuerdo con las enzimas a determinar (colinesterasa sérica y eritrocitaria).
  • – Realizar las determinaciones enzimáticas de acuerdo a protocolos.
  • – Comprobar la calidad técnica de los resultados respecto a la respuesta de controles de análisis.
  • – Anotar resultados e incidencias en la HRD correspondiente conforme a protocolos.

C3: Aplicar técnicas de análisis toxicogenético en muestras humanas procedentes de individuos vivos o de cadáveres según PNTs de evaluación de la susceptibilidad tóxica.

• CE3.1 Describir las técnicas de tratamiento y preparación de sangre o tejidos previo a la extracción de ADN de acuerdo con su naturaleza.
• CE3.2 Describir las técnicas de extracción, purificación y cuantificación de ADN conforme a protocolos.
• CE3.3 Indicar las baterías de genes susceptibles de amplificación, ligados a susceptibilidad respecto a procesos toxicocinéticos concretos (enzimas ligados al sistema microsómico, enzimas responsables del metabolismo del alcohol, otros).
• CE3.4 Explicar la detección de mutaciones en genes ligados a la susceptibilidad a tóxicos mediante técnicas de minisecuenciación (SNaPShot) o técnicas de alto rendimiento (Microarrays) entre otras.
• CE3.5 Enumerar equipos utilizados en las técnicas de identificación de genes de susceptibilidad indicando su utilización, mantenimiento y verificación.
• CE3.6 Indicar el procedimiento de aseguramiento de la calidad de los resultados mediante el uso de controles y estándares concretando las medidas a tomar cuando la evaluación es negativa.
• CE3.7 Especificar cómo se garantiza la trazabilidad y calidad del proceso de análisis toxicogenético mediante el registro de pormenores e incidencias en HRDs.
• CE3.8 En un supuesto práctico de diagnóstico de susceptibilidad a los efectos del consumo agudo de alcohol etílico, siguiendo un protocolo:
  • – Seleccionar las muestras y prepararlas de acuerdo a protocolos.
  • – Extraer, purificar y cuantificar el ADN de las muestras conforme a protocolos.
  • – Preparar el equipo analítico efectuando las operaciones de verificación conforme a protocolos.
  • – Cargar el equipo con las muestras y controles preparados de acuerdo con la técnica de identificación disponible.
  • – Comprobar la calidad técnica de los resultados respecto a los controles de análisis.
  • – Anotar en la HRD correspondiente los pormenores e incidencias y resultados técnicos conforme a protocolos.

C4: Aplicar técnicas de análisis químicos de muestras medioambientales según PNTs de identificación de la presencia y cuantificación de contaminantes.

• CE4.1 Describir técnicas de preparación de muestras biológicas (homogeneización, centrifugación), y no biológicas (filtrado, dilución, lixiviado de muestras sólidas) según su naturaleza.
• CE4.2 Enumerar los parámetros de determinación de salubridad en el análisis de aguas (pH, conductividad, demanda biológica y química de oxígeno – DBO y DQO-, carbono orgánico total – COT), conforme a su origen y uso a que están destinadas definiendo su concepto y aplicaciones.
• CE4.3 Explicar las técnicas de espectrofotometría de absorción atómica o de acoplamiento de plasma inductivo indicando su fundamento y aplicación en el análisis de sustancias inorgánicas en muestras líquidas y lixiviados dependiendo de la presunta fuente contaminante.
• CE4.4 Explicar las técnicas de cromatografía de gases o líquida indicando su fundamento y aplicación en el análisis de de tóxicos orgánicos en muestras líquidas y lixiviados dependiendo de la presunta fuente contaminante (medicamentos, plaguicidas, disolventes u otros compuestos orgánicos).
• CE4.5 Indicar el procedimiento de aseguramiento de la calidad de los resultados mediante el uso de controles y estándares concretando las medidas a tomar cuando la evaluación es negativa.
• CE4.6 Especificar cómo se garantiza la trazabilidad y calidad del proceso de análisis toxicogenético mediante el registro de pormenores e incidencias en HRDs.
• CE4.7 En un supuesto práctico de contaminación de un arroyo por los vertidos de una planta envasadora de plaguicidas organofosforados de acuerdo a protocolos:
  • – Preparar el lixiviado de acuerdo con la técnica de análisis de plaguicidas organofosforados siguiendo PNTs.
  • – Preparar el cromatógrafo de gases de acuerdo con las especificaciones técnicas.
  • – Inyectar la muestra en el cromatógrafo de gases de acuerdo al protocolo normalizado.
  • – Evaluar la calidad técnica del cromatograma obtenido.
  • – Cumplimentar los registros de trabajo con las condiciones de análisis, incidencias, y resultados de acuerdo con los protocolos de calidad.

C5: Aplicar técnicas de análisis microbiológicos de muestras medioambientales según PNTs de detección y cuantificación de microorganismos patógenos y no patógenos contaminantes.

• CE5.1 Relacionar tipos de microorganismos patógenos y no patógenos en función del origen de la contaminación ambiental (colectores urbanos, vertidos hospitalarios, agrícolas, purines, entre otros).
• CE5.2 Seleccionar las técnicas de filtración o de dilución seriada de muestras líquidas y lixiviados y de siembra en medios de cultivo generales de recuento de número más probable de contaminantes totales en función de la fuente de la contaminación.
• CE5.3 Indicar los medios de cultivo específicos de detección preliminar y cuantificación en función del tipo de microorganismo que se presume responsable de la contaminación.
• CE5.4 Indicar los medios de cultivo específicos de identificación genérica de microorganismos dependiendo de los resultados obtenidos en los cultivos preliminares.
• CE5.5 Describir las técnicas de tinción, bioquímicas y de biología molecular de identificación específica dependiendo del tipo de microorganismos aislados de la muestra.
• CE5.6 Especificar la valoración de la calidad técnica de los resultados de los parámetros analizados respecto a microorganismos control.
• CE5.7 Describir la forma de recogida de incidencias y de resultados técnicos de los análisis microbiológicos medioambientales de modo que permita la trazabilidad, la calidad y su inclusión en un expediente.
• CE5.8 En un supuesto práctico de detección preliminar de la contaminación de un arroyo con purines, de acuerdo a PNTs:
  • – Preparar diluciones seriadas de la muestra de aguas contaminadas.
  • – Preparar los medios de cultivo para recuento general de microorganismos de origen fecal.
  • – Efectuar la siembra de las diluciones en el medio e incubar.
  • – Valorar el número más probable de microorganismos presentes en la muestra.

C6: Aplicar técnicas experimentales «in vitro» de muestras medioambientales según PNTs de valoración de la potencia ecotóxica.

• CE6.1 Indicar los requisitos de preparación y dilución en condiciones estériles de muestras líquidas y lixiviados de acuerdo con su naturaleza.
• CE6.2 Explicar la técnica de valoración de la potencia ecotóxica de diluciones seriadas de muestras medioambientales añadidas a suspensiones de bacterias luminiscentes, Vibrio fishery o especies afines, mediante medidas de de inhibición de la viabilidad y su registro.
• CE6.3 Explicar la técnica de valoración de la potencia ecotóxica de diluciones seriadas de muestras medioambientales añadidas a cultivos de algas unicelulares (Chlorella sp., Cyanobacter sp., u otras) mediante medidas de inhibición del crecimiento y su registro.
• CE6.4 Explicar la técnica de valoración de la potencia ecotóxica de diluciones seriadas de muestras medioambientales añadidas a neonatas obtenidas de cultivos de crustáceos microscópicos (Daphnia sp., Artemia sp., u otras) mediante observación de la movilidad y del crecimiento y su registro.
• CE6.5 Enumerar técnicas de valoración de la potencia ecotóxica de diluciones seriadas de muestras medioambientales administradas a especies animales inferiores (lombrices de tierra), o superiores (peces) mediante establecimiento de CL50 (concentración letal que mata al 50% de los animales) y registro de los datos.
• CE6.6 Enumerar técnicas de valoración de la potencia ecotóxica de diluciones seriadas de muestras medioambientales añadidas a cultivos de líneas celulares representativas de niveles tróficos mediante el establecimiento de CI50 (concentración que produce un 50 % de inhibición del crecimiento o viabilidad) a partir de datos de la determinación de parámetros bioquímicos (captación del rojo neutro u otro) y registro de los datos.
• CE6.7 En un supuesto práctico de valoración de la potencia ecotóxica de un vertido industrial mediante pruebas de toxicidad «in vitro» según protocolos:
  • – Preparar diluciones seriadas del vertido en condiciones de esterilidad.
  • – Añadir las diluciones a suspensiones de Vibrio fishery y medir la emisión de luminiscencia con cada dilución.
  • – Añadir las diluciones a cultivos de Chlorella vulgaris y medir su concentración con cada dilución.
  • – Añadir las diluciones a cantidades prefijadas de medio de cultivo con un número conocido de neonatas de Dahnia magna y observar la inhibición de su movilidad.
  • – Añadir las diluciones a cultivos de células de peces y realizar, después de tiempos prefijados de cultivo, medidas de exclusión de rojo neutro.
  • – Registrar los datos obtenidos en los registros correspondientes para la elaboración de las distintas curvas de inhibición.

Capacidades cuya adquisición debe ser completada en un entorno real de trabajo:

C1 respecto a CE1.6; C2 respecto a CE2.7; C3 respecto a CE3.8; C4 respecto a CE4.7; C5 respecto a CE5.8 y C6 respecto a CE6.7.

Otras capacidades:

• Responsabilizarse del trabajo que desarrolla y del cumplimiento de los objetivos.
• Finalizar el trabajo en los plazos establecidos.
• Emplear tiempo y esfuerzo en ampliar conocimientos e información complementaria para utilizarlos en su trabajo.
• Demostrar cordialidad, amabilidad y actitud conciliadora y sensible a los demás.
• Demostrar interés por el conocimiento amplio de la organización y sus procesos.
• Participar y colaborar activamente en el equipo de trabajo.
• Comunicarse eficazmente con las personas adecuadas en cada momento, respetando los canales establecidos en la organización.
• Respetar los procedimientos y normas internas de la empresa.
• Demostrar cierto grado de autonomía en la resolución de contingencias relacionadas con su actividad.
• Transmitir información con claridad, de manera ordenada, estructurada, clara y precisa.

1. Contaminación medioambiental y valoración de la potencia ecotóxica de muestras forenses

• Fuentes de contaminación.
• Fenómenos ecotóxicos.
• Muestras (aguas, vertidos y muestras sólidas): manipulación, procesamiento, conservación y custodia
• Contaminantes químicos: plaguicidas, disolventes y medicamentos. Metodología para la detección y cuantificación de contaminantes químicos.
• Contaminación orgánica y microbiana. Metodología para la detección y cuantificación de contaminación orgánica y microbiana.
• Valoración de la potencia ecotóxica. Cadena alimentaria y circulación de materiales. Especies diana. Metodología de la valoración de la potencia ecotóxica. Determinación de índices de toxicidad en sistemas bacterianos, en crustáceos marinos, en especies superiores y en sistemas «in vitro» (cultivos celulares).

2. Valoración de la exposición y del daño tóxico y parámetros de interés forense en muestras humanas y animales

• Tipos de muestras para la valoración de la exposición y del daño tóxico: sangre, suero y tejidos.
• Intoxicaciones más frecuentes susceptibles de estudios de valoración del daño tóxico y parámetros bioquímicos asociados. Intoxicaciones por plaguicidas organofosforados y carbámicos: colinesterasas sérica y eritrocitaria, carboxilesterasa, neurotoxicoesterasa. Intoxicaciones por metales pesados (Pb): ala dehidrasa, zincprotoporfirina. Consumo crónico de alcohol etílico: ADH, AlDH, GGT, GOT, GPT.
• Otros parámetros bioquímicos de interés forense. Diagnóstico de muerte súbita de origen cardíaco: CK, CK-MB, troponina. Hipo o hiperglucemia: glucosa.
• Parámetros complementarios al diagnóstico de muerte por sumersión: hemodilución, hemoconcentración, Na, K, estroncio, péptido natriurético auricular.

3. Técnicas de análisis bioquímico de interés forense en análisis de toxicidad mediambiental

• Determinaciones enzimáticas: características, fisiología, cinética enzimática.
• Metodología de análisis de enzimas de interés forense en fluidos biológicos.
• Determinación de otros parámetros bioquímicos hemáticos de interés forense: glucosa, iones y metales.

4. Factores genéticos de la susceptibilidad individual a tóxicos: toxicogenética de aplicación forense

• Principales sistemas enzimáticos polimórficos ligados a diferencias de susceptibilidad. Sistema microsómico hepático. N-acetiltransferasas. Alcohol y acetaldehido deshidrogenasas.
• Genes candidatos para la valoración del riesgo tóxico en cada sistema.
• Técnicas de extracción, cuantificación, purificación de ADN, robots de extracción.
• Técnicas de detección de mutaciones en los genes candidatos: minisecuenciación, microarrays.
• Plataformas de alto rendimiento.

5. Normativa de riesgos laborales y medioambientales

• Aplicación según género (mujer y hombre).

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