MF2512_3: Obtención, mantenimiento, expansión y preservación de cultivos celulares

Obtención, mantenimiento, expansión y preservación de cultivos celulares

MF2512_3.

Módulo de formación MF2512_3: Obtención, mantenimiento, expansión y preservación de cultivos celulares

Obtener, mantener, expandir y preservar cultivos celulares

60 horas.

C1: Analizar tipos, estructuras, ciclos y líneas celulares, en relación con sus características biológicas.

• CE1.1 Describir tipos de células, estructuras celulares y subcelulares, indicando sus funciones.
• CE1.2 Identificar tipos de microscopios utilizados en el laboratorio de cultivos celulares, indicando sus partes y funcionamiento.
• CE1.3 Explicar técnicas de tinción aplicadas a cultivos celulares, detallando sus indicaciones y distinguiendo los colorantes empleados.
• CE1.4 Definir genética celular, detallando la estructura y función de los cromosomas, ciclo celular y su importancia en relación con los cultivos celulares.
• CE1.5 Definir cultivos celulares, indicando su evolución histórica, métodos de obtención, aplicaciones y líneas celulares empleadas.
• CE1.6 Explicar las etapas del ciclo celular, asociándolas a la caracterización de diferentes tipos de células.
• CE1.7 Explicar técnicas que garanticen la asepsia de los cultivos celulares, considerando materiales, personal, instalaciones, entre otros.
• CE1.8 En un supuesto práctico, de identificación de células y líneas celulares, atendiendo a sus características biológicas:
  • – Aplicar colorantes vitales, identificando células eucariotas y procariotas.
  • – Detectar etapas del ciclo celular diferenciado interfases de mitosis.
  • – Caracterizar células primarias y líneas celulares, atendiendo a la tasa de interfases y mitosis.

C2: Aplicar técnicas de aislamiento y selección celular, asegurando la viabilidad y asepsia del proceso.

• CE2.1 Diferenciar tipos de técnicas para aislamiento, selección y purificación celular, evitando contaminaciones.
• CE2.2 Identificar técnicas mecánicas para aislamiento de células a partir de tejidos, fluidos y material biológico, detallando los materiales utilizados.
• CE2.3 Describir técnicas enzimáticas para aislamiento de células a partir de tejidos, fluidos y material biológico, separándolas de restos tisulares.
• CE2.4 Reconocer la técnica de explante para el aislamiento de células a partir de tejidos u órganos, seleccionando medios de cultivo.
• CE2.5 Explicar el procedimiento de adherencia al plástico, vidrio o soporte de cultivo para selección de células y poblaciones celulares, detallando los materiales utilizados y evitando contaminaciones.
• CE2.6 Describir métodos de inmunoselección celular, empleando anticuerpos específicos frente a los antígenos celulares.
• CE2.7 Reconocer sistemas de registro de datos, estimando la importancia de la trazabilidad del proceso y la privacidad en el caso de muestras humanas.
• CE2.8 Identificar los residuos generados durante el proceso de aislamiento, selección y purificación de células, indicando sistemas de separación para su posterior gestión.
• CE2.9 En un supuesto práctico de aislamiento, y selección y purificación celular, aplicando medidas de higiene y seguridad biológica:
  • – Aislar células a partir de tejidos, fluidos y material biológico, aplicando técnicas de disgregación mecánica, centrifugación y filtración.
  • – Seleccionar células y poblaciones celulares por el procedimiento de adherencia al plástico, vidrio o soporte de cultivo, considerando diferentes tipos de frascos.
  • – Purificar células, aplicando métodos de lavado con medio de cultivo, mecanismos enzimáticos de adherencia, antibióticos, perlas magnéticas, entre otros.

C3: Aplicar técnicas para el cultivo de células primarias y de líneas celulares inmortalizadas, asegurando la viabilidad de las células y la asepsia.

• CE3.1 Describir materiales y reactivos para el cultivo de células primarias y líneas celulares inmortalizadas, atendiendo al tipo celular, línea celular y densidad de la siembra, indicando pautas para su preparación.
• CE3.2 Explicar la técnica de cultivo de células aisladas de material biológico o primarias y líneas celulares inmortalizadas, considerando condiciones físicas de cultivos celulares y tisulares.
• CE3.3 Describir la morfología normal de un cultivo celular, indicando métodos para su mantenimiento y control.
• CE3.4 Explicar métodos de subcultivo de células o pases, en función de la confluencia, levantamiento y recolección de células, indicando mecanismos de control.
• CE3.5 Establecer pautas para mantener las condiciones asépticas de los cultivos, resaltando la importancia de materiales y reactivos estériles, incubadores, campanas de flujo laminar, entre otros, limpios y esterilizados.
• CE3.6 Explicar procedimientos de separación de residuos generados durante un cultivo celular en contenedores específicos, disponiéndolos para su gestión por la entidad responsable.
• CE3.7 Establecer sistemas para registro de datos de contaje, datos de morfología celular, entre otros, estimando su importancia para monitorización de los cultivos y nuevas siembras.
• CE3.8 Identificar los residuos generados durante el proceso de cultivo de células primarias y de líneas celulares inmortalizadas, indicando sistemas de separación para su posterior gestión.
• CE3.9 En un supuesto práctico de cultivo de células primarias y de líneas celulares inmortalizadas, asegurando la viabilidad de las células y la asepsia:
• – Preparar medios de cultivo, reactivos (enzimas, tampones, entre otros), aditivos, frascos de cultivo de uso, entre otros materiales, considerando tipo celular, línea celular y densidad de la siembra.
  • – Cultivar células primarias y líneas celulares inmortalizadas, considerando condiciones físicas específicas.
  • – Cambiar medios de cultivo, controlando la integridad celula,r utilizando el microscopio.
  • – Realizar un pase, considerando la confluencia, levantamiento y recolección de células de un frasco de cultivo, controlando el número y viabilidad de las células pasadas mediante un recuento.

C4: Aplicar técnicas de criopreservación y descongelación de células, asegurando su viabilidad y trazabilidad.

• CE4.1 Diferenciar criopreservantes celulares, indicando sus ventajas e inconvenientes.
• CE4.2 Explicar los procesos de criopreservación y descongelación de células, indicando pautas para su mantenimiento en condiciones asépticas.
• CE4.3 Determinar sistemas de etiquetado, almacenamiento y registro de datos, asegurando la trazabilidad y búsqueda rápida de las muestras.
• CE4.4 Determinar condiciones de almacenamiento de células criopreservadas, indicando sistemas para su control.
• CE4.5 Describir técnicas para análisis de viabilidad y recuperabilidad celular (capacidad proliferativa), utilizando el microscopio.
• CE4.6 Identificar residuos generados durante procesos de criopreservación y descongelación, indicando sistemas de separación para su posterior gestión.
• CE4.7 En un supuesto práctico de selección de técnicas de criopreservación y descongelación de células, garantizando su viabilidad y trazabilidad:
  • – Criopreservar células, seleccionando previamente los criopreservantes y considerando su tipo.
  • – Almacenar las células criopreservadas, etiquetándolas previamente, controlando las condiciones de la unidad y criogenia.
  • – Registrar los datos, asegurando la trazabilidad y búsqueda rápida de las muestras.
  • – Observar al microscopio las células descongeladas, analizando su viabilidad y recuperabilidad.

C5: Aplicar técnicas de envasado de células, asegurando su trazabilidad, viabilidad y asepsia.

• CE5.1 Describir métodos de envasado, considerando la utilización de los productos celulares y medidas de higiene y seguridad biológica.
• CE5.2 Identificar materiales de acondicionamiento para el envasado de productos celulares, indicando los requisitos específicos para asegurar su viabilidad.
• CE5.3 Establecer medidas para el envasado de suspensiones celulares en condiciones asépticas, atendiendo a la criopreservación.
• CE5.4 Describir métodos de etiquetado de productos celulares que garanticen su identificación y trazabilidad, considerando la protección de datos en el caso de productos humanos.
• CE5.5 Explicar sistemas de registro de datos que aseguren la trazabilidad del proceso, aplicando procedimientos manuales o informatizados.
• CE5.6 En un supuesto práctico de envasado de células, asegurando su trazabilidad, viabilidad y asepsia:
  • – Seleccionar materiales de acondicionamiento para el envasado, en función de ausencia de endotoxinas, esterilidad, apirogenicidad, calidad, entre otros.
  • – Envasar productos celulares, considerando su utilización y tipología.
  • – Etiquetar productos celulares, indicando código, número de lote, fecha, caducidad, entre otros.
  • – Registrar los datos aplicando procedimientos manuales o informatizados.

Capacidades cuya adquisición debe ser completada en un entorno real de trabajo:

C1 respecto a CE1.8; C2 respecto a CE2.9; C3 respecto a CE3.9; C4 respecto a CE4.7 y C5 respecto a CE5.6.

Otras capacidades:

• Proponerse objetivos retadores que supongan un nivel de rendimiento y eficacia superior al alcanzado previamente.
• Emplear tiempo y esfuerzo en ampliar conocimientos e información complementaria.
• Mantener una actitud asertiva, empática y conciliadora con los demás demostrando cordialidad y amabilidad en el trato.
• Favorecer el desarrollo profesional y personal en el equipo de trabajo.
• Demostrar creatividad en el desarrollo del trabajo que realiza.
• Demostrar resistencia al estrés, estabilidad de ánimo y control de impulsos.
• Adoptar códigos de conducta tendentes a transmitir el contenido del principio de igualdad.

1. Tipos celulares

• Tipos de células: eucariotas y procariotas.
• Estructura celular: componentes celulares y sus funciones.
• Ciclo celular.
• Fases del ciclo celular: interfase y mitosis.
• Genética celular.
• Soportes de cultivo: tipos de frascos de cultivo.
• Cultivos celulares: historia.
• Aplicaciones.
• Líneas celulares.
• Células primarias.
• Asepsia.
• Factores a tener en cuenta en la manipulación aséptica: materiales, personal, instalaciones, entre otros.
• Importancia de la manipulación aséptica en cultivos celulares.
• Identificación de los distintos tipos celulares.

2. Técnicas de aislamiento, cultivo y criopreservación celular

• Técnicas de aislamiento y purificación celular.
• Tipos de aislamiento celular a partir de un material biológico.
• Método de explantes y disgregación mecánica.
• Método de digestión enzimática. Enzimas utilizadas comúnmente.
• Selección de poblaciones celulares: adherencia al plástico, separación celular, e inmunoselección.
• Técnicas de cultivo celular.
• Condiciones ambientales habituales en un cultivo celular (temperatura, humedad y dióxido de carbono y otros gases).
• Cultivo en hipoxia y normoxia.
• Tipos de medios de cultivo y reactivos para el cultivo celular.
• Enzimas, tampones, y otros.
• Frascos de cultivo usados habitualmente en cultivo celular.
• Densidad de siembra.
• Morfología de los distintos tipos celulares.
• Cambio de medio: frecuencia en función de la línea celular.
• Cambio de medio total o parcial.
• Confluencia.
• Subcultivo o pase: levantamiento y recolección de células de un frasco de cultivo.
• Contaje.
• Nueva siembra para expansión.
• Registro de datos para la monitorización de los cultivos.
• Técnicas de criopreservación y descongelación de células.
• Criopreservación.
• Criopreservantes utilizados.
• Condiciones de la criopreservación y descongelación de células.
• Viabilidad y recuperabilidad celular.
• Condiciones de almacenamiento de células criopreservadas.
• Registro de células criopreservadas e importancia de su trazabilidad.

3. Envasado de productos celulares

• Técnicas de envasado de productos celulares.
• Uso de los productos celulares.
• Tipos de envasado en función del uso de los productos.
• Materiales de acondicionamiento.
• Requisitos de los materiales de acondicionamiento (ausencia de endotoxinas, esterilidad, apirogenicidad, calidad del material, entre otros).
• Etiquetado y trazabilidad de los productos celulares (código, número de lote, fecha, caducidad, entre otros).
• Documentación necesaria para la liberación de lotes envasados.

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